 
         
                    土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)检测试剂盒(微量法100T/48S)
| 货号 | SH0406 | 售价(元) | 2160 | 
| 规格 | 100T/48S | CAS号 | 
- 产品简介
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| 货号 | 名称 | 规格 | 
| SH0406 | 土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)检测试剂盒(微量法100T/48S) | 100T/48S | 
测定意义:
β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、细菌和真菌等生物体,是催化木聚糖类半纤维素降解的关键酶,产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。另外,β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业,比传统的漂白法环保,具有广泛的应用价值。
测定原理:
S-β-XYS催化对硝基苯酚-β-D-木糖苷产生对硝基苯酚,对硝基苯酚在405nm处有特征吸收峰,测定405nm光吸收增加速率,可计算S-β-XYS活性。
组成:
| 产品名称 | SH0406-100T/48S | Storage | 
| 提取液:液体 | 100ml | 4℃ | 
| 试剂一:液体 | 1ml | 4℃避光 | 
| 试剂二:液体 | 10ml | 4℃ | 
| 试剂三:液体 | 10ml | 4℃ | 
| 说明书 | 一份 | |
自备仪器和用品:
天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
粗酶液提取:
约0.1g鲜土或风干土样,加入1ml提取液进行冰浴匀浆,室温振荡提取30min,然后10000g,4℃,离心10min,取上清待测。
测定操作表:
1、 分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至405nm。
2、 操作表
| 
 | 对照管 | 测定管 | 
| 样本(μl) | 40 | 40 | 
| 试剂一(μl) | 
 | 10 | 
| 试剂二(μl) | 80 | 70 | 
| 混匀,45℃水浴20min | ||
| 试剂三(μl) | 80 | 80 | 
| 混匀,静置5min,405nm处测定吸光值A,计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。 | ||
β-木糖苷酶活性计算公式:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线:y=13.226x+0.0011,R2=0.9998;x为标准品浓度(μmol/ml),y为吸光值ΔA。
酶活定义:每克土样每天催化产生1μmol对硝基苯酚的酶量为一个酶活单位。
β-木糖苷酶活性(μmol/d /g 土样)=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T
=16.33×(ΔA-0.0011)÷W
V样总:加入提取液体积,1ml; V反总:反应总体积,0.12ml;V样:反应中样品体积,0.04ml; W:样品质量,g;T:反应时间,20min=1/72d;
b.用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线:y=6.613x+0.0011,R2=0.9998;x为标准品浓度(μmol/ml),y为吸光值ΔA
酶活定义:每克土样每天催化产生1μmol对硝基苯酚的酶量为一个酶活单位。
β-木糖苷酶活性(μmol/d /g 土样)=(ΔA-0.0011) ÷6.613×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T
=32.66×(ΔA-0.0011)÷W
V样总:加入提取液体积,1ml; V反总:反应总体积,0.12ml;V样:反应中样品体积,0.04ml; W:样品质量,g;T:反应时间,20min=1/72d;
ΔA控制在0.01-1范围内,若ΔA大于1,可适当减小样本量。
标准曲线线性范围为:0.01μmol/ml-0.5μmol/ml。
 
        