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IP,coIP,CHIP细胞组织通用裂解液

货号 WB30326 售价(元) 350
规格 100ml CAS号
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货号

名称

规格

WB30326

IP,coIP,CHIP细胞组织通用裂解液

100ml

产品简介

      本产品包含20mM Tris(pH7.5),150mM NaCl,1% Triton X-100,0.5% Sodium deoxycholate,以及AEBSF,sodium pyrophosphate,β-glycerophosphate,EDTA,Na3VO4,leupeptin等八种抑制剂及抑菌剂。其中AEBSF为PMSF的稳定及安全替代品。您无需添加PMSF。其裂解产物适合coIP,IP,CHIP实验。产品本身可室温保存,而裂解后的样品建议低温保存。

其裂解的样品可不使用传统BCA法,而通过文渊阁的抗干扰5分钟蛋白定量试剂盒,一步操作,5分钟获得精准定量。

产品组分及保存:

      细胞组织通用裂解液:100ml

      室温或低温保存皆可,一年有效。

使用说明

A,对于培养细胞样品:

      1. 对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS洗一遍。按照6孔板每孔加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。冰浴15分钟使细胞更充分裂解。

对于悬浮细胞:离心收集细胞。按照6孔板每孔细胞加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。冰浴15分钟使细胞更充分裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。

      2. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。

B,对于组织样品:

      1. 把组织剪切成细小的碎片。

      2. 按照每20毫克组织加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)

      3. 用玻璃匀浆器匀浆(或使用文渊阁开发的手持式电动组织匀浆机匀浆),直至充分裂解。

      4. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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