产品介绍:

Viagen DireciPCR@ DNAExtraction System(DirectPCRDNA提取系统)是一种单管系统，用于从小鼠尾巴，耳片，卵黄囊和培养细胞内快递制备DNA。Viagen Biotech允许用的DirectPCR DNAExtraction Systrm获得的DNA提取物与基因分型用的基因组PCR兼容。生物样本的粗提取物与许多分子生物学级的试剂比如PCR都难以兼容，部分原因在于粗提取物内含有抑制剂。DirectPCR不仅介导生物样品的快速裂解，而且含有抑制剂，能够有效抑制PCR扩增用粗提裂解物中的抑制效应，同时最大程度保持释放出来的基因组DNA的完整性。DirecPCR@操作起来，完全消除任何溶液转移或开管步骤，根本上节省了大量时间和精力。

产品特点

1)省时:更少的动手时间;尾巴裂解液粗提物即可用于PCR;

2)省钱:仅需成本的反应流程;

3)安全:无有机试剂;

4)环保:更少消耗(有机试剂，管子，枪头等等)

5)可靠有效:100%成功率保证高产量

应用实例:PCR Genotyping using DirectPCR Lysis Reagents

简单流程

1)用DirectPCR裂解鼠尾;

2)85°C孵育45min;

3)取1ul裂解液进行PCR基因型研究。

详细流程

1)对0.5cm鼠尾，使用添加新鲜制备的0.2-0.4mg/ml蛋白酶K的200-300ul DirecPCR Lysis Reagent（Tail）鼠尾裂解液。蛋白酶K在DirectPCR中稳定保存~24h。如果处理少量鼠尾，会很难称量蛋白酶K粉末，可直接使用Viagen提供的基因组PCR级的蛋白酶K溶液，使用浓度为0.5-1.0mg/ml（每1ml DirectPCR中加入25-50ul蛋白酶K溶液）。见表1,DirectPCR@Lysis Reagent (Tail)起始使用条件。

2)置于旋转杂交炉中，55°C转动管子处理5-6h或直到看不见组织团。若有必要，能过夜裂解样本，不会影响效率。完全裂解至关重要。由于一些尾巴不能直接接触到溶液，摇动管子更换下鼠尾位置，最好在处理2-3h之后。

3) 水浴锅内85°C孵育粗提液45min。【可选】于步骤4)前离心10s沉淀毛发。粗提液可置于-20°C保存1年(或4°C保存1周)，不会降低效率.

4) 每50ul PCR应体系加入0.5-1.0ul裂解液。

表1.DirectPCR Lysis Reagent (Tail)起始使用条件。

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