 
         
                    原果胶含量检测试剂盒(微量法100T/48S)
| 货号 | SH0512 | 售价(元) | 1620 | 
| 规格 | 100T/48S | CAS号 | 
- 产品简介
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| 货号 | 名称 | 规格 | 
| SH0512 | 原果胶含量检测试剂盒(微量法100T/48S) | 100T/48S | 
测定意义:
果胶是植物细胞壁主要组成成分之一,分为水溶性果胶和不溶性果胶,即原果胶。因其具有良好的乳化、增稠和凝胶作用,在食品、纺织、印染、烟草、冶金等领域具有较广泛的应用。
测定原理:
原果胶在稀酸中水解为可溶性果胶,并进一步转化为半乳糖醛酸,产物在强酸中与咔唑缩合生成紫红色化合物,在530 nm处有特征吸收峰。
试剂的组成和配制:
| 产品名称 | SH0512-100T/48S | Storage | 
| 提取液:液体 | 100ml×2 | 4℃ | 
| 提取液:液体 | 100ml | 4℃ | 
| 标准品:液体 | 1ml | 4℃ | 
| 试剂一:浓硫酸 | 自备 | -- | 
| 试剂二:液体 | 2ml | 4℃ | 
| 试剂三:液体 | 3ml | 4℃避光 | 
| 说明书 | 一份 | |
自备仪器和用品:
天平、研钵、常温离心机、水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、浓硫酸和蒸馏水。
样品处理:
将组织样品捣碎,按照样品质量(g)和提取液一体积(ml)为1: 20的比列(建议取约0.05g样品,加入1ml提取液一),置于90℃恒温水浴锅中浸提30min,取出冷却后于5000g、 25℃离心10min,去掉上清,沉淀中再加入1ml提取液一重复操作一次,离心后去上清,沉淀中加入1ml提取液二,置于90℃恒温水浴锅中水解1h,取出冷却后于8000g、25℃离心15min,取上清液待测。
测定操作表:
| 
 | 空白管 | 标准管 | 对照管 | 测定管 | ||||
| 样本(μl) | 
 | 
 | 30 | 30 | ||||
| 标准品(μl) | 
 | 30 | 
 | 
 | ||||
| 浓硫酸(μl) | 180 | 180 | 180 | 180 | ||||
| 混匀、90℃水浴10min,取出后冷却 | ||||||||
| 试剂二(μl) | 
 | 
 | 30 | 
 | ||||
| 试剂三(μl) | 30 | 30 | 
 | 30 | ||||
| 混匀,25℃静置30min | ||||||||
| 蒸馏水(μl) | 90 | 60 | 60 | 60 | ||||
| 充分混匀,取200μl置于微量石英比色皿/96孔板中,测定530nm处吸光值,分别记为A1、A2、A3和A4。△A1=A2-A1,△A2=A4-A3 | ||||||||
计算公式:
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
原果胶含量(mg /g 鲜重)= (C标准×V标) ×△A2÷△A1÷(W÷V样总) = 0.25×△A2÷△A1÷W
C标准:标准品浓度,0.25mg/ml;V标:反应体系中加入标准品体积,0.02ml; V样总:加入提取液体积,1ml;W:样本鲜重,g。
b.用96孔板测定的计算公式如下
原果胶含量(mg /g 鲜重)= (C标准×V标) ×△A2÷△A1÷(W÷V样总) =0.25×△A2÷△A1÷W
C标准:标准品浓度,0.25mg/ml;V标:反应体系中加入标准品体积,0.02ml; V样总:加入提取液体积,1ml; W:样本鲜重,g。
注意事项:
1、空白管和标准管只需测定一次。
2、浓硫酸具有强腐蚀性,操作时需特别注意,90℃加热取出后冷却再打开盖子,以防液体飞溅烧伤。
3、若吸光值超过1,可将样本提取液进行适当稀释再进行测定,并在计算公式中乘以稀释倍数。
4、最低检出限为10μg/g。
 
        