 
         
                    土壤植酸酶(phytase)检测试剂盒(分光光度法50T/24S)
| 货号 | SH0403 | 售价(元) | 696 | 
| 规格 | 50T/24S | CAS号 | 
- 产品简介
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| 货号 | 名称 | 规格 | 
| SH0403 | 土壤植酸酶(phytase)检测试剂盒(分光光度法50T/24S) | 50管/24样 | 
测定意义:
植酸酶(phytase)是催化植酸及其盐类水解为肌醇与磷酸(盐)的一类酶的总称,属磷酸单酯水解酶,它能将食品和饲料中植酸及其盐转化为可供有机体利用的有效磷,降低粪便中的磷含量,减轻对环境的污染,改善营养成分的吸收和利用,因此具有极其广泛的研究和应用价值。
测定原理:
植酸酶在一定温度和pH值条件下,水解底物植酸钠生成无机磷与肌醇衍生物,无机磷在酸性环境中与钼酸铵显色剂反应生成蓝色复合物,在700nm处有特征吸收峰,根据700nm处吸光值变化可计算得植酸酶活性。
组成:
| 产品名称 | SH0403-50T/24S | Storage | 
| 缓冲液:液体 | 60ml | 4℃ | 
| 试剂一:粉剂 | 1瓶 | 4℃避光 | 
| 试剂二:液体 | 30ml | 4℃ | 
| 显色剂:粉剂 | 6瓶 | 4℃避光 | 
| 说明书 | 一份 | |
试剂一:粉剂×1瓶,4℃避光保存,临用前加缓冲液30ml 配制,现用现配;用不完的试剂4℃保存一个月。
显色剂:粉剂×6瓶,4℃避光保存,临用前根据用量每瓶加1ml 双蒸水溶解,再加4ml 试剂二混匀。
自备仪器和用品:
天平、低温离心机、可见分光光度计、1ml 玻璃比色皿、恒温水浴锅,甲苯(不允许快递)。
样本处理:
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。
测定操作表:
| 
 | 对照管 | 测定管 | 
| 样本(g) | 0.06 | 0.06 | 
| 甲苯 | 40 | 40 | 
| 振荡混匀,室温放置15min | ||
| 缓冲液(µl) | 1000 | 
 | 
| 试剂一(µl) | 
 | 1000 | 
| 混匀,37℃孵育24h,10000g,4℃离心5min,取上清 | ||
| 上清 | 500 | 500 | 
| 显色剂(µl) | 500 | 500 | 
| 混匀,静置15min,测定700nm处吸光值,△A=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。 | ||
酶活性计算公式:
标准曲线:y = 1.759x + 0.0084,R2 = 0.9977;x为标准品浓度(μmol/ml ),y为吸光值△A。
酶活性定义:在37℃,pH5.5的条件下,每克土样每小时从5mmol/L的植酸钠溶液中释放出1μmol的无机磷为一个酶活力单位。
植酸酶活性(μmol/h /g 土样)=(△A-0.0084)÷1.759×V反总÷W÷T
=0.41×(△A-0.0084)
V反总:反应总体积,1.04ml ;T:反应时间,24h;W:样本质量,0.06g。
注意事项:
1、显色剂需要临用前根据用量配制,每一瓶是5个样本的用量,新配制的显色剂若有颜色则已经污染或者试剂过期,应放弃使用。
2、ΔA线性范围为0.01-1。
 
        