测定意义：

总磷酸盐包含正磷酸盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、多聚磷酸盐等各种磷酸盐的形式，反应了水土中的磷酸盐水平，是一个水质和土壤质量评价的重要指标。

测定原理：

在酸性溶液中，在分解剂和高温条件下，将无机磷酸盐和有机磷酸盐水解成正磷酸盐，正磷酸盐可与钼酸铵反应成磷钼酸，在还原剂存在时被还原为磷钼蓝，在710nm处有特征吸收峰。

组成：

试剂四：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加4ml蒸馏水充分溶解，然后将试剂五全部加入试                剂四中充分混匀。 

自备仪器和用品：

天平，震荡仪、常温离心机、酶标仪、96孔板、蒸馏水。

样品处理：

1. 水样：按照水样体积（ml）：试剂一体积（ml）：试剂二体积（ml）为10:1:2的比例（建议取1ml水样，加入100μl试剂一和200μl试剂二）95℃沸水浴30min，冷却后待测。

2. 土样：按照土壤质量（g）：蒸馏水体积(ml)：试剂一体积（V）：试剂二体积（V）=1：10:1:2（建议称取约0.1g土样，加入1ml蒸馏水，再加入100μl试剂一和200μl试剂二），95℃沸水浴振荡30min，10000g ，25℃离心10min，取上清液待测。

测定操作表：

计算公式：

标准曲线：y = 0.0237x + 0.0016，R² = 0.9989；x为PO₄^-浓度μg/ml，y为吸光值△A。

1. 水样：

总磷酸盐含量（μg/ml）= (△A-0.0016)÷ 0.0237×V样÷（V样÷V样总）

                      = 54.8×(△A-0.0016)

2. 土样：

总磷酸盐含量（μg/g）= (△A+0.0063)÷ 0.0489×V样÷（W×V样÷V样总）

                      =54.8×(△A+0.0063)÷W

V样：加入样本体积；0.04ml；V样总：样本总体积，1.3ml；W，土样质量，g。

注意事项：

1. 配制的试剂四一周内使用完。

2. 检出限为65μg/ml或65μg/g。