 
         
                    土壤几丁质酶(S-Chitinase)检测试剂盒(分光光度法50T/24S)
| 货号 | SH0369 | 售价(元) | 816 | 
| 规格 | 50T/24S | CAS号 | 
- 产品简介
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| 货号 | 名称 | 规格 | 
| SH0369 | 土壤几丁质酶(S-Chitinase)检测试剂盒(分光光度法50T/24S) | 50管/24样 | 
测定意义:
几丁质主要存在于虾、蟹、昆虫等甲壳类动物的外壳与软体动物的器官(例如乌贼的软骨),以及真菌类的细胞壁中,而几丁质酶(EC 3.2.1.14)可催化几丁质水解,具有抵御真菌侵染的作用,成为抗真菌病害的研究热点。
测定原理:
几丁质酶水解几丁质产生N-乙酰氨基葡萄糖,进一步与对二甲氨基苯甲醛产生红色化合物,在585nm处有特征吸收峰,吸光值增加速率反映了几丁质酶的活性。
试剂组成和配制:
| 产品名称 | SH0369-50T/24S | Storage | 
| 试剂一:液体 | 10ml | 4℃ | 
| 试剂二:液体 | 4ml | 4℃ | 
| 试剂三:液体 | 50ml | 4℃避光 | 
| 说明书 | 一份 | |
自备仪器和用品:
天平、水浴锅、离心机、震荡仪、可见分光光度计、1 ml玻璃比色皿,甲苯、蒸馏水。
样品处理:
新鲜土样风干,过30-50目筛。
测定操作表:
| 
 | 对照管 | 测定管 | 
| 土样(g) | 0.2 | 0.2 | 
| 甲苯(μl) | 30 | 30 | 
| 混匀,25℃静置15min | ||
| 蒸馏水(μl) | 200 | 
 | 
| 试剂一(μl) | 
 | 200 | 
| 混匀,37℃培养24h | ||
| 蒸馏水(μl) | 400 | 400 | 
| 4000rpm,4℃,离心10min,取上清300μl于新的EP管中 | ||
| 试剂二(μl) | 30 | 30 | 
| 混匀,沸水浴5min | ||
| 试剂三(μl) | 900 | 900 | 
| 混匀,37℃显色20min,取1ml于1ml玻璃比色皿中,蒸馏水调零,测定585nm处吸光值,记为A对照管和A测定管,ΔA=A测定管-A对照管。 | ||
计算公式:
标准曲线:y=5.2714x-0.0007,R2=0.9989;x为标准品浓度(mg/ml),y为吸光值ΔA。
酶活性定义:37℃条件下,每克土壤每天分解几丁质产生1μg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量为一个酶活性单位。
土壤几丁质酶活性(μg/d/g 土样)=(ΔA +0.0007)÷5.2714×V反总÷W÷T×1000= 598×(ΔA +0.0007)
V反总:反应体系总体积,0.63ml;W:样本质量,0.2g;T:反应时间,1d;1000:1mg/ml=1000μg/ml
注意事项:
试剂一充分混匀后再使用。
 
        