测定意义：

LPS又称甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和单酯）。LPS广泛的存在于各种生物中。血清中LPS的异常增高常见于胰腺炎和胰腺癌。

测定原理：

LPS催化油酯水解成脂肪酸，利用铜皂法测定脂肪酸生成速率，即可计算LPS活性。

试剂组成和配制：

试剂二：液体14ml×1瓶，4℃保存。每次使用前用震荡混匀器剧烈震荡20min;

标准品：液体10μl×1瓶，10 µmol/ml的标准溶液，4℃保存。临用前加入3.168 ml甲苯，充分溶解。

自备仪器和用品：

研钵、台式离心机、震荡混匀器、可见分光光度计、1ml玻璃比色皿、可调式移液枪、甲苯100ml、冰和蒸馏水。

样本处理：

建议称取约0.1g土样，加入1ml试剂一进行冰浴匀浆，再用回旋式振荡器振荡提取15min，4℃，4000g离心10min，取上清待测。

S-LPS测定操作：

1、分光光度计预热30 min以上，调节波长到710 nm，蒸馏水调零。

2、试剂一和试剂二置于37℃水浴预热30min以上。

3、在5ml EP管中依次加入下列试剂：

37℃振荡反应10 min；

37℃振荡反应10 min后，8000g，25℃，离心10min，取上清液

37℃振荡反应5 min后，静置5min，取800μl上层液加入1 ml玻璃比色皿，于710nm处测定吸光值。

注意事项:

空白管和标准管只需测定一次。

S-LPS活性计算公式：

活性单位定义：37℃中每克土样每分钟水解橄榄油生成1μmol脂肪酸为一个酶活单位。

S-LPS (μmol/min/g 土样) = [C标准品×(A测定管-A空白管)÷（A标准管- A空白管）]×V反总÷（W×V样÷V样总）÷T

=16×[(A测定管－A空白管)÷（A标准管- A空白管）]÷W

C标准品：10 µmol/ml；V反总：反应总体积，2ml；V样：反应中加入样本体积，0.125ml；V样总：加入提取液体积，1ml；W：样本质量，g；T：催化反应时间，10 min。