 
         
                    土壤α-葡萄糖苷酶(S-α-GC)检测试剂盒(100T/48S)
| 货号 | SH0335 | 售价(元) | 1260 | 
| 规格 | 100T/48S | CAS号 | 
- 产品简介
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| 货号 | 名称 | 规格 | 
| SH0335 | 土壤α-葡萄糖苷酶(S-α-GC)检测试剂盒(微量法100T/48S) | 100管/48样 | 
测定意义:
S-α-GC能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖,是纤维素分解酶系中重要组成成分之一,在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。
测定原理:
S-α-GC能够催化对-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有特征光吸收。
试剂组成和配制:
| 产品名称 | SH0335-100T/48S | Storage | 
| 试剂一:甲苯 | 5ml(自备) | 4℃ | 
| 试剂二:粉剂 | 1瓶 | -20℃ | 
| 试剂三:液体 | 20ml | 4℃ | 
| 试剂四:液体 | 15ml | 4℃ | 
| 说明书 | 一份 | |
试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入10ml蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂仍-20℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
样品处理:
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。
测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至400nm,蒸馏水调零。
2、加样表
| 试剂名称 | 测定管 | 对照管 | 
| 风干土样(g) | 0.02 | 0.02 | 
| 试剂一(μl) | 10 | 10 | 
| 
 | 室温振荡混匀15min | 90℃振荡混匀15min | 
| 试剂二(μl) | 130 | 
 | 
| 蒸馏水 | 
 | 130 | 
| 试剂三(μl) | 160 | 160 | 
混匀, 37℃振荡反应1h后,90℃水浴5min(盖紧,防止水分散失),流水冷却,
10000g 25℃离心10min,取上清液(在EP管或96孔板中加入下列试剂);
| 上清液(μl) | 70 | 70 | 
| 试剂四(μl) | 130 | 130 | 
充分混匀,室温静置2min后, 400nm处测定吸光值A,计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。
S-α-GC活力计算:
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y = 0.0032x -0.0027;x为标准品浓度(μmol/L),y为吸光值。
单位的定义:每天每g土样中产生1 μmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-α-GC活力(μmol/d/g 土样)= (ΔA+0.0027) ÷0.0032×V反总÷W÷T =112.5×(ΔA+0.0027)
T:反应时间,1h=1/24d; V反总:反应体系总体积:3×10-4 L;W:样本质量,0.02g。
b.用96孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y = 0.0016x -0.0027;x为标准品浓度(μmol/L),y为吸光值。
单位的定义:每天每g土样中产生1 μmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-α-GC活力(μmol/d /g 土样)= (ΔA+0.0027) ÷0.0016×V反总÷W÷T =225×(ΔA+0.0027)
T:反应时间,1h=1/24d; V反总:反应体系总体积:3×10-4 L;W:样本质量,0.02g。
 
        